问题标题:
几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解.通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力.回答下列问题:(1)在进行基因工程操作时,若
问题描述:

几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解.通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力.回答下列问题:

(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是___.提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是___.

(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是___.

(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是___(答出两点即可).

(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是___.

(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是___.

丁立勋回答:
  (1)由于嫩叶中几丁质酶转录的mRNA较多,因此在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料.提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是防止提取的mRNA被RNA酶分解.   (2)以mRNA为材料可以获得cDNA,原因是mRNA可根据碱基互补配对原则逆转录为cDNA.   (3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是:质粒载体中有启动子、终止子,便于目的基因的表达;质粒中有标记基因便于筛选;质粒中含有复制原点等.   (4)DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键.   (5)基因表达包括转录和翻译两个步骤,若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,其可能的原因是几丁质酶基因没有转录或转录的mRNA没有翻译.   故答案为:   (1)嫩叶中几丁质酶转录的mRNA较多 防止提取的mRNA被RNA酶分解   (2)mRNA根据碱基互补配对原则逆转录为cDNA   (3)质粒载体中有启动子、终止子,便于目的基因的表达;质粒中有标记基因便于筛选;质粒中含有复制原点等   (4)磷酸二酯键   (5)几丁质酶基因没有转录或转录的mRNA没有翻译
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